A SLAM és a SLAM-család receptorainak funkcionális vizsgálata dendritikus sejtekben = The role of SLAM and SLAM-related receptors in dendritic cell functions

A dendritikus sejtek (DS-ek) szabályozó tevékenységüket többek között a T-sejt válasz erősségét és minőségét is szabályozó ún. ko-stimulációs jelek modulációjával végzik. A pályazat keretében a SLAM (Signaling Lymphocyte Activation Molecule) receptor családba tartozó CD84 co-receptor humán monocita-eredetű dendritikus sejtekben betöltött funkcióit vizsgáltuk. 1. A CD84 receptor funkcionális vizsgálatára két egymást kiegészítő in vitro rendszert állítottunk be. Az egyikben a CD84/CD84 homoasszociáció CD40-ligand vagy Lipopoliszacharid-indukálta aktivációra gyakorolt hatását vizsgáltuk CD84 molekulát expresszáló fibroblaszt sejtek és DS-ek közös tenyészeteiben. A másikban a CD84 expressziót RNS-interferencia segítségével gátoltuk. 2. Kimutattuk, hogy a CD84 receptor fontos szerepet játszik a dendritikus sejtek funkcionális aktivitásának szabályozásában és ezen keresztül a naív T-sejtek differenciációjának szabályozásában 3. Microarray analízissel azonosítottunk a CD84 receptor által szabályozott géneket és jelátviteli pályákat. A szabályozott gének többsége az egyes típusú interferon útvonal része ami jelentős lehet az SLE-vel való kapcsolat szempontjából. 4. A receptorfunkciók szabályozásának egyik fontos és hatékony módja az alternatív splicing. A CD84-nek 7 alternatív splicing segítségével képződő variánsát ismerjük. Ezekre specifikus kvantitatív PCR assay-ket állítottunk be és jellemeztük az egyes variánsok mennyiségét nyugvó és aktivált DS-ekben. | The immunoregulatory function of dendritic cells (DC-s) is delivered in part via the modulation of co-receptor signaling that has a major effect on the intensity and quality of the T-cell response. In this work we examined the function of CD84, a member of the SLAM (Signaling Lymphocyte Activation Molecule) receptor family in regulating various dendritic cell functions. 1. We set up two complementary in vitro systems to study the effect of CD84 on signaling in dendritic cells induced by CD40-ligand or Lipopolysaccharide (LPS). CD84 expression was modulated by overexpression or RNA-interference. 2. We found that CD84 is an important regulator of dendritic cell functions including the regulation of effector T-cell differentiation from naive T lymphocytes. 3. By microarray analysis we identified target genes and signaling pathways controlled by CD84. Many of the CD84-regulated genes are part of the type I interferon pathway that may be highly significant considering the connection between SLAM receptors and Lupus. 4. A recently emerging field of regulation of gene function is modulation of transcripts generated by alternative splicing. We developed gene transcript-specific quantitative PCR assays for the seven splice forms of CD84 and characterized their expression in resting and activated DC-

Dendritikus sejtek differenciálódásának szabályzása hormonreceptorok által = Regulation of dendritic cell differentiation by nuclear hormone receptors

Jelen pályázatunkban a PPARg (perosisome-proliferator activated receptor gamma) magreceptor lehetséges szerepét tanulmányoztuk a dendritikus sejtek differenciálódása során. Megfigyeltük, hogy a PPARg transzkripciós factor, rövid idő alatt és jelentős mértékben indukálódik a dendritikus sejtek differenciálódása során. Kimutattuk, hogy a PPARg koordinált módon szabályozza a CD1 géncsalád expresszióját dendritikus sejteken. PPARg agonistákkal kezelve a sejteket a CD1a expresszió lecsökkent a CD1d szint megemelkedett. A PPARg aktivált sejtekben a fokozott CD1d expresszió előidézte ezen sejtek fokozott képességét az NKT (Natural-killer T) sejtek aktiválására. Ezen túlmenően megfigyeltük, hogy a CD1d indukció nemcsak PPARg agonistákkal hanem retinoidokkal is kiváltható volt az RARa receptor aktiválásán keresztül. Eredményeink szerint a két útvonal összefügg, mivel a PPARg magreceptor aktiválása endogén retinoid termeléshez vezet a retinol dehidrogenáz 10 és a retinaldehid dehidrogenáz aktiválása révén és ez a retinoid szignál a felelős a fokozott CD1d expresszióért. Összefoglalva, eredményeink szerint PPARg magreceptor aktiválása egy összehangolt transzkipciós választ hoz létre a dendritikus sejtekben, melynek hatására ezen sejtek fokozottan képesek az NKT sejtek aktiválására. A fokozott NKT sejt aktiválásnak in vivo kedvező szerepe lehet az autoimmun folyamat lefolyására. | We are interested in the biological function of PPARg (perosisome-proliferator activated receptor gamma) receptor on dendritic cell differentiation. We found that the PPARg is immediately up-regulated after the induction of monocyte-derived DC differentiation. Unexpectedly, we found that CD1 glycoproteins, a class of molecules responsible for the presentation of self and foreign modified lipids, were coordinately regulated by PPARg activation. CD1a levels were reduced, whilst CD1d expression was induced. Enhanced expression of CD1d was coupled to the selective induction of invariant natural-killer T cell (iNKT cell) proliferation. In addition we observed that CD1d is rapidly and robustly upregulated by retinoids through activation of retinoic acid receptor. Moreover we identified that endogenous retinoid metabolism including retinol and retinal metabolizing enzymes such as retinol dehydrogenase 10 (RDH10) and retinaldehyde dehydrogenase 2 (RALDH2) is under the control of PPARg. Activation of PPARg leads to intracellular generation of all-trans retinoic acid and enhanced retinoid signaling. These data show that retinoid metabolism is an integral part of PPARg controlled transcriptional events in human dendritic cells. In summary our results suggest that the lipid activated transcription factor, PPARg orchestrates a transcriptional response leading to the development of a DC subtype which has an augmented potential to activate iNKT cells

A dendritikus sejtek szerepe az immunológiai szinapszis kialakításában, a T-limfociták homeosztázisának és aktiválásának szabályozásában = The role of dendritic cells in the formation of immunological synapses and in the regulation of T lymphocyte homeostasis and activation

A CD14+ monociták CD1a- és CD1a+ DS-ekké differenciálódnak, de a CD1a- és CD1a+ sejtek arányát a szérum lipoproteinek dózis függően befolyásolják. Kinetikai vizsgálatok igazolták, hogy az éretlen CD1a- DS-ek CD1a+ sejtekké differenciálódnak, ezt az átalakulást az aktiváció gátolja. A CD1a- és CD1a+ DS-ek hasonló migrációs, de eltérő internalizáló, citokin és kemokin termelő képességgel rendelkeznek. Mindkét DS altípus hatékony T-limfocita aktiváló képességgel rendelkezik, de nagy mennyiségű IFNγ citokin termelésére csak a CD1a+ DS-ek által aktivált T-sejtek képesek. A transzkripcionálisan aktív PPARγ nukleáris receptor és target génje, az apolipoprotein E lényegesen magasabb expressziót mutat a CD1a-, mint a CD1a+ sejtekben. A PPARγ-CD1a+ sejtek kialakulása és a CD1a expressziót regulálni képes szérum lipidek hatása azt igazolja, hogy a PPARγ kifejeződése és aktivációja fontos szerepet játszik az immunológiai tolerancia kialakításában és fenntartásában. Az interleukin-7 (IL-7) citokin elősegíti a nyugvó T-limfociták túlélését és limfopéniásokban a T sejt osztódást. Az emelkedett IL-7 szint HIV-fertőzött egyedekben a T-limfocitákon magas Fas receptor kifejeződéssel és a Fas-mediált apoptózissal szembeni fokozott érzékenységgel társul. Kimutattuk, hogy az IL-7 naiv és memória sejtekben a Fas expresszió fokozódását váltja ki, és fontos szerepe van a T-sejt egyensúly fenntartásában és HIV ferőzöttekben a Fas-mediált apoptosis kiváltásában. | We have shown that CD14+ monocytes differentiate to both CD1a- and CD1a+ DC but the ratio of CD1a- and CD1a+ cells is modulated by serum lipoproteins in a dose dependent manner. Kinetic studies revealed that immature CD1a- DC differentiate to CD1a+ cells, but activation signals permanently block this process. The co-existing CD1a+ and CD1a- DC have similar migratory potential but differ in their internalizing capacity, cytokine and chemokine profiles. Although both moDC subtypes were potent inducers of T-lymphocyte proliferation, high production of IFNγ by inflammatory T-cells was induced preferentially by CD1a+ cells pointing to functional differences of these subsets. High expression of transcriptionally active PPARγ and their target gene apolipoprotein E in CD1a- cells compared to PPARγ-CD1a+ cells together with the regulatory potential of serum lipids on CD1a expression suggested lipid-mediated tolerance induction acting through PPARγ. Interleukin-7 (IL-7) promotes survival of resting T-lymphocytes and induces T cell proliferation in lymphopenic conditions. Elevated IL-7 levels in HIV-infected individuals accompanied with high Fas expression on T-cells induces increased sensitivity to Fas-mediated apoptosis. We have shown that IL-7 upregulates Fas expression on naïve and memory T-cells demonstrating an important role of IL-7 in the regulation of T-cell homeostasis and in Fas-mediated apoptosis in HIV-infected individuals

Perrin and Förster unified: dual-laser triple-polarization FRET (3polFRET) for interactions at the Förster-distance and beyond

K

Vibrational tests and analysis on materials used in aircraft

The current cargo capacity for aircraft is about 20% of their total weight, increasing this ratio would significantly increase the economics of aircraft logistics. This is why it’s important for material sciences to advance so that the materials used in aircraft construction become lighter while still retaining their structural integrity. In this paper we examined materials used in aircraft construction (steel, aluminum, plastics and composites) at the University of Szeged Faculty of Engineering. Using vibrational analysis we analyzed the test pieces for their natural frequency, we did this to gain insight to the range of frequencies that are least attenuated by the material the aircraft wings are made from. Using the data we gathered we wish to draw conclusions to which materials are more suited for aircraft wing construction

Developing fatigue test machine for composite material

This paper’s goal is to introduce the third step of the EFOP-3.6.1-16-2016-00014. project on the Faculty of Engineering, University of Szeged. In this period the production technology of composite material was chosen and a fatigue test machine was developed and tested. The paper shortly describes the composite materials and summarizes the theory of fatigue than it presents the process of the development with several prototypes of fatigue test machine, some of which were manufactured and tested. Initially a shaker played the key role in the first two conceptions and finally a crank mechanism became as the best solution. The main solved problems during the development were selection of bearings and solving the partly dynamic balancing of the moving parts

Vibrational tests and analysis on materials used in aircraft

The current cargo capacity for aircraft is about 20% of their total weight, increasing this ratio would significantly increase the economics of aircraft logistics. This is why it’s important for material sciences to advance so that the materials used in aircraft construction become lighter while still retaining their structural integrity. In this paper we examined materials used in aircraft construction (steel, aluminum, plastics and composites) at the University of Szeged Faculty of Engineering. Using vibrational analysis we analyzed the test pieces for their natural frequency, we did this to gain insight to the range of frequencies that are least attenuated by the material the aircraft wings are made from. Using the data we gathered we wish to draw conclusions to which materials are more suited for aircraft wing construction

Developing fatigue test machine for composite materials

This paper’s goal is to introduce the third step of the EFOP-3.6.1-16-2016-00014. project on the Faculty of Engineering, University of Szeged. In this period the production technology of composite material was chosen and a fatigue test machine was developed and tested. The paper shortly describes the composite materials and summarizes the theory of fatigue than it presents the process of the development with several prototypes of fatigue test machine, some of which were manufactured and tested. Initially a shaker played the key role in the first two conceptions and finally a crank mechanism became as the best solution. The main solved problems during the development were selection of bearings and solving the partly dynamic balancing of the moving parts